人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA 试剂盒Human Tumor Necrosis Factor Alpha,TNF-α ELISA Kit

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人TNF-α抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的人TNF-α会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗人TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗人TNF-α抗体与结合在包被抗体上的人TNF-α结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值，TNF-α浓度与OD值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中TNF-α的浓度。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的TNF-α（加标样品），重复测定并计算其均值，回收率为测定值与理论值的比率。

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100 批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。 批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。 批内差： CV<10% 批间差： CV<12%

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的TNF-α，并倍比稀释成1:2，1:4，1:8，1:16的待测样本，线性范围即为稀释后样本中TNF-α含量的测定值与理论值的比率。